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外泌體分離指南
發(fā)布時間: 2025-09-23 點擊次數(shù): 22次外泌體,作為細胞間通信的關(guān)鍵信使,其在疾病診斷、藥物遞送和再生醫(yī)學等領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛力。然而,如何從復(fù)雜的生物樣本中高效、高純度地分離出外泌體,是后續(xù)所有功能研究與臨床應(yīng)用的首要挑戰(zhàn)和基石。不同的樣本類型、體積大小和研究目的,決定了分離技術(shù)的選擇策略。
一、常規(guī)樣本分離方案
超速離心法
原理:依據(jù)密度和粒徑差異進行梯度離心。
特點:金標準,純度較高,但耗時較長。
超濾離心法
原理:通過濾膜截留外泌體。
特點:操作簡便,適合大體積樣本初步濃縮。
沉淀法
原理:使用聚合物(如PEG)沉淀外泌體。
特點:回收率高,但可能共沉淀雜質(zhì)。
二、小體積樣本分離方案
免疫磁珠法/親和磁珠法
原理:通過抗體結(jié)合外泌體表面標志蛋白(如CD9、CD63)。
特點:高特異性,適合低濃度樣本。
尺寸排阻法
原理:基于粒徑大小在凝膠柱中分離。
特點:保留外泌體活性,適合功能實驗。
膜親和柱法
原理:結(jié)合膜過濾與親和吸附。
特點:快速純化,適合微量樣本。
三、大體積樣本分離方案
切向流過濾
原理:連續(xù)過濾濃縮,保留目標顆粒。
特點:適合規(guī)?;苽?,效率高
研究者選擇合適的技術(shù)方案,是解鎖外泌體生物學功能、推動其從基礎(chǔ)科研走向臨床轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵第一步。
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